Исследования на половые инфекции методами ИФА и ПЦР

Методика ПЦР – популярная диагностика вирусов и бактерий, которая в основе своего исследования берет принципы и научную базу молекулярной биологии.

Суть ПЦР-диагностики

При анализе ПЦР используются принципы молекулярной биологии. При его проведении используются специальные ферменты, многократно копирующие фрагменты РНК и ДНК, а также микроорганизмы, возбуждающие заболевания и находящиеся в биологических материалах человека. Копирование происходит в несколько этапов, поэтому образуется цепная реакция. После этого специалисты лаборатории делают сверку полученных данных с общей базой и выявляют возбудителей заболевания, а также их концентрацию. Диагностику проводят в специальном приборе, который производит охлаждение и нагревание пробирки с биоматериалом и называется амплификатор. Соблюдение температурного режима влияет на правдивость результатов анализа.

Суть ПЦР-диагностики

Фрагменты ДНК микроорганизмов могут содержаться в следующих биологических материалах:

  • биологические жидкости;
  • кровь и ее производные;
  • соскоб эпителиальных клеток или мазок;
  • моча;
  • мокрота;
  • слизь и другие биологические выделения;
  • биопаты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.
Суть ПЦР-диагностики

Суть метода

Для анализа метом ПЦР из биоматериала выделяют фрагменты нуклеиновых кислот (ДНК и РНК потенциальных возбудителей), затем добавляют вещества-катализаторы: синтетический фрагмент ДНК искомой инфекции (специально разработанные эталонные маркеры, ДНК-праймеры) и ферменты. Их задача – найти ДНК заданной инфекции, при ее наличии, и заставить многократно делиться. Это позволяет идентифицировать возбудителя, визуализировать его. Процесс происходит в специальной емкости – амплифликаторе, который автоматически меняет температуру от 50 до 95 ˚С. Без этого ДНК делиться не будет.

Копируется только тот участок ДНК, который соответствует заданным условиям. Как только праймер находит нужный участок, он запускает процесс его копирования – это и есть полимеразная цепная реакция. Деление происходит быстро: ДНК копируется за 3 минуты (один цикл), то есть примерно через 40 минут количество фрагментов будет достаточным для идентификации.

Суть метода

Анализ методом ПЦР может быть произведен в режиме реального времени или в обычном режиме. В первом случае контроль за количеством фрагментов ДНК осуществляется после каждого цикла деления. Чем больше изначальное число клонируемых молекул, тем больше будет копий − то есть можно дать количественную оценку инфекционного поражения.

Краткая схема метода ПЦР

Что такое ПЦР?

ПЦР – высокочувствительная полимеразная цепная реакция, которая обнаружит возбудителя болезни (вирусы, бактерии, хламидии) в организме. Методика основана на определении специфической структуры ДНК, имеющейся у инфекции. ПЦР проводится при подозрении на скрытое хроническое течение инфекционного процесса в организме, пребывающего в латентной форме. К особенностям и достоинствам ПЦР относят:

  • высокую 100% чувствительность к возбудителям любого типа с наличием уникальных фрагментов нуклеиновых кислот;
  • быстроту получения результата;
  • возможность определения численности одного вида возбудителя;
  • одновременное диагностирование нескольких возбудителей.

Лаборанты без труда с помощью полимеразноцепной реакции определяют ДНК структуру  одиночного возбудителя, что дает возможность отслеживать и оценивать результаты лечения после назначения медикаментозной терапии. ПЦР, как новый метод исследования, незаменим для постановки диагноза при таких заболеваниях:

Что такое ПЦР?
  • туберкулез;
  • дифтерия;
  • сальмонеллез;
  • ВИЧ;
  • СПИД;
  • гепатит С независимой стадии;
  • бактериоз.
Читайте также:  Какие антибиотики нужно принимать при трихомониазе?

Точность ПЦР как методики достигает 99% с выявлением возбудителей на начальном этапе поражения организма при отсутствии особой симптоматики у пациентов. Это гарантирует быстрое излечение от болезней, достижение устойчивой ремиссии в ряде случаев.

ПЦР исследование

ПЦР – самый точный анализ крови на гепатит С

Перечень предлагаемых исследований на HCV включает несколько пунктов, отличающихся по стоимости, срокам готовности и способу выполнения.

Если обратиться к протоколам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), порядок диагностики инфекции включает несколько последовательных этапов.

Для начала сдают:

  • общий анализ крови и мочи;
  • биохимия крови;
  • исследование на содержание глюкозы (строго натощак);
  • анализ на ВИЧ;
  • флюорография;
  • иммунограмма (при подозрении на наличие аутоиммунных патологий).

При отклонении показателей биохимического анализа крови от физиологической нормы пациенту назначают тест, основанный на обнаружении специфических антител, вырабатываемых при контакте вируса с кровью (ИФА).

Но подобный анализ крови на гепатит С имеет существенный недостаток. Процесс синтеза антител зависит от функционирования и выработки иммунокомпетентных клеток. Индивидуальные особенности организма могут стать причиной как ложноотрицательного, так и ложноположительного ответа.

Перед назначением теста ИФА врач рассказывает пациенту о возможной ошибке, что вызывает ответный вопрос: «Какой анализ крови показывает гепатит С с минимальным риском получения неверных результатов?» Для подтверждения или опровержения диагноза самым точным лабораторным тестом является проведение ПЦР методом real time.

Дальнейшая тактика действий зависит от того, что покажет исследование. В случае подтверждения диагноза, пациенту сразу же назначают гепатопротекторы, предупреждают о важности правильного питания и здорового образа жизни. Но таргетная терапия невозможна без определения уровня вирусной нагрузки и генотипа гепатита С.

Некоторые лекарственные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В. Поэтому для исключения осложнений, дополнительно назначают анализы на HBsAg. HCV лечат только после получения отрицательного результата исследования.

ПЦР анализ крови на инфекции положительный

В современной лечебной практике для диагностирования используют метод полимеразной цепной реакции или ПЦР. Метод ПЦР позволяет добиться дублирования фрагментов ДНК и РНК в исходном материале. Это значит, что положительный анализ ПЦР приходит даже при малых концентрациях возбудителя в крови. Поэтому он имеет высокую точность диагностирования заболевания и может применяться на ранних стадиях.

Что означает ПЦР положительный анализ?

Если при проведении метода полимеразной цепной реакции выявляется ДНК искомого организма, такой анализ ЦПР является положительным. Данный результат показывает, что в организме в текущее время присутствует возбудитель. Но не стоит забывать и остальных методах, которые являются не менее полезными

ПЦР анализ крови на инфекции положительный

Чем отличается ПЦР, ИФА анализ и анализ на антитела?

Хоть эти методы и направлены на одни и те же цели, механизм действия у них отличается: ПЦР показывает наличие элементов ДНК или РНК возбудителя в биологическом материале. Для ПЦР чаще используется материал из предполагаемого очага инфекции.

Читайте также:  Преждевременная эякуляция

ИФА или анализ на антитела позволяет идентифицировать реакцию антиген-антитело. Иммуноферментный анализ используется для уточнения стадии заболевания. ИФА анализ крови на антитела показывает наличие иммуноглобулинов в крови. Наличие антител определяется вне зависимости от места локализации очага инфекции

Анализ крови на антитела поможет обнаружить в крови наличие:

  • Иммуноглобулинов типа IgA
  • Иммуноглобулинов типа IgG
  • Иммуноглобулинов типа IgM

Обнаружение в крови Иммуноглобулинов типа говорит об активном инфекционном процессе IgM. Если заболевание протекает в активной стадии, пациенту требуется пройти лечение. Если ПЦР отрицательный, а анализ на антитела положительный, что это значит? Бывают ситуации, когда по результатам анализа у пациента ПЦР отрицательно, а ИФА положительно.

ПЦР анализ крови на инфекции положительный

Подобное может произойти вследствие нескольких факторов:

  • Остаточный или иммунологический след, который остается в результате выработки иммуноглобулина.
  • Разные места забора материала при проведении ИФА и ПЦР.
  • Пациент перенес данное заболевание в прошлом, возможно бессимптомно и не является больным на момент обследования.

В подобном случае необходима детализация анализов крови и консультация врача, ведь нужно разобраться, что именно дает положительную реакцию.

Что делать, если пришел положительный ПЦР анализ?

К сожалению, симптомы некоторых заболеваний не всегда видны, и в организме человека таятся скрытые инфекции. После получения положительного результата ПЦР, не стоит сразу паниковать и волноваться. Существует вероятность ложно-позитивной реакции ПЦР. В подобной ситуации необходимо повторно выполнить данный анализ.

Если при первом диагностировании сдавался ПЦР качественный, то при повторном рекомендуется проходить ПЦР количественный.

Выполняйте ПЦР анализы в лаборатории при профильной клинике. Если анализ транспортируется в сетевую лабораторию, велика вероятность накладок. Если диагноз подтвердится, необходимо обратится к профильному специалисту для проведения комплексного лечения.

При необходимости сдать любые анализы на инфекции, обращайтесь в нашу клинику.

ПЦР диагностика – практика и достоинства

Теоретическая составляющая лабораторного исследования с использованием методики ПЦР дает целый ряд практической выгоды при диагностировании заболеваний:

  • хламидиоз дыхательных и половых путей и органов (гонорея и прочие);
  • микоплазмоз;
  • уреаплазмоз;
  • гепатит типа С и В;
  • гарднереллез (бактериальный вагиноз);
  • молочницу (кандидоз);
  • мононуклеоз (инфекционного характера);
  • трихомониаз;
  • СПИД (ВИЧ-инфекцию);
  • ВПЧ (папилломавирусную инфекцию) – вирус онкогенного типа;
  • туберкулез;
  • вирусы гриппа В и А;
  • герпесную инфекцию;
  • боррелиоз;
  • клещевой энцефалит;
  • листериоз;
  • хеликобактериоз.

Методом диагностики полимеразной цепной реакцией, как видно, допустимо получить массу результатов определения инфекций для дальнейшего диагностирования и назначения излечивающей терапии. Можно отметить массу положительных достоинств генетических исследований ПЦР методики:

  • Универсальность – методика позволяет отыскивать скрытые РНК или же ДНК при условии, что иные исследования бессильны. При этом, используемое в лабораторных условиях оборудование имеет стандартный тип, и данный не зависит от сферы поиска и собранного биологического материала.
  • Чувствительность. Методом диагностики инфекций ПЦР допустимо найти всего единственный экземпляр частицы возбудителя в материале, и собрать целую картину заболевания.
  • Специфичность исследования скрыта в том, что в одном фрагменте единовременно возможно отыскать несколько типов чужеродных генетических возбудителей без вреда на качество других микроорганизмов.
  • Оперативность – часто является основным и главным приоритетом в обследовании человека. Исследовательский процесс в виде постановки реакции организмов, их размножение и диагностирование, от самого момента забора биологического материала пациента, занимает всего 1 день.
Читайте также:  Хламидиоз: причины, признаки и симптомы, лечение

К достоинству оперативности допустимо добавить фактор конкретного определения возбудителя инфекций, а не изучить реакцию организма на его вторжение. То есть, ПЦР дает возможность на 100% диагностировать болезнь в период инкубации микроорганизма на этапе, когда не существует никаких лабораторных или же клинических признаков заболевания.

Заболевания, которые определяет анализ

Спектр параметров, которые можно выявить при помощи полимеразной цепной реакции, достаточно велик.

Сюда можно отнести:

  • генетическое родство;
  • хронические заболевания;
  • редкие вирусные заболевания;
  • грибковые инфекции;
  • бактериальные процессы;
  • венерические патологии.

У беременных определяются следующие патологические процессы и заболевания.

Инфекции, вызванные вирусным агентом:

  • герпес;
  • ВПЧ;
  • цитомегаловирус;
  • вирусные гепатиты В и С;
  • парвовирус;
  • ВИЧ инфекция;
  • мононуклеоз.

Инфекции, вызванные микробами:

  • уреаплазмоз;
  • микоплазмоз;
  • хламидиоз;
  • гонорея;
  • бактериальный вагиноз;
  • туберкулез;
  • трихомониаз.

С помощью ПЦР выявляется ВИЧ статус беременной пациентки, характер течения венерического заболевания.

Устанавливается гормональное состояние и оценивается их уровень.

Большинство неспецифических заболеваний можно диагностировать полимеразной цепной реакцией.

Это могут быть возбудители гриппа, пневмококковой инфекции, цервицита или эндометрита, а также грамм позитивные или негативные микроорганизмы, поражающие органы мочеполовой системы.

Трактовка результатов ПЦР у женщин

Расшифровка результатов ПЦР, не связанных с гинекологией и урологией, является одинаковой для обоих полов, но в ином случае есть своя специфика. Обнаружение у женщины половой инфекции указывает на урогенитальное заболевание, которое может поразить уретру, органы малого таза, мочевой пузырь и почки. Как следствие, у женщины могут наблюдаться сопутствующие заболевания: пиелонефрит, цистит, уретрит, аднексит и т.д. Все зависит от клинической симптоматики и результатов других анализов.

Еще одной опасностью является обнаружение инфекции во время беременности женщины, так как существует большой риск инфицирования плода. Ребенок может заразиться во время беременности или проходя через родовые пути. Это грозит ему серьезными последствиями и болезнями. Самые опасный период — заражение в первом триместре беременности. Обнаружение инфекции требует лечения, а в некоторых случаях и прерывание беременности поэтому диагностику ПЦР лучше делать до планирования ребенка.

Как правильно подготовится к сдаче анализов на скрытые инфекции

Перед посещением медицинского учреждения для сдачи биоматериала из влагалища или уретры необходимо:

  • за двое суток исключить половые контакты;
  • за двое суток исключить применение интравагинальных таблеток, суппозиториев и спринцевания;
  • на протяжении двух часов до взятия биоматериала не мочиться;
  • женщинам рекомендуется сдавать анализ на 4-5 день менструального цикла, сразу после завершения менструальных кровотечений.

Перед визитом в лабораторию для сдачи крови на анализ следует:

  • не принимать пищу на протяжении 8 часов (рекомендуется кровь сдавать утром натощак);
  • за два дня не пить алкоголь и не есть слишком жирную, копченую, соленую пищу;
  • не курить непосредственно перед сдачей крови;
  • исключить физическое и эмоциональное перенапряжение;
  • посоветоваться с врачом насчет необходимости отмены принимаемых лекарственных препаратов.